Основан в 1560 г. по мысли Иоанна Грозного npи соборном храме Успеню Пресвятой Богородицы, построенном в 1510-1515 г. великим князем Василием Иоаннови чем на месте деревянной церкви, основанной в 1383 г. в память явления на этом месте Тихвинской иконы Божией Матери.

В Смутное время с 5 июня по 14 сентября 1613 г. монастырь был осажден шведами, которые под начальством Делагарди овладели Новгородскою областью, в том числе и Тихвинским посадом, но монастырь взять им не удалось, так как все приступы их, благодаря заступничеству чудотворной иконы Тихвинской Божией Матери были отбиты, а удачной вылазкой 14 сентября шведы были прогнаны. Через год они пытались вторично взять монастырь но обитель была чудесно спасена, так как шведам представилось, что многочисленное войско вышло им навстречу, и они удалились. 29 июня 1623 г. монастырь совершенно был сожжен и разрушен пожаром, вскоре восстановлен и до Петра I назывался то великою обителью, то лаврою. Первоначальна настоятельство в монастыре было игуменское и устав дан общежительный; в 1651 г. монастырь возведен на степень архимандрии, в 1852 г. возведен в1-й класс, а в 1853 г. отменен общежительный устав.

В монастыре было восемь храмов: соборный Успенский, древней apxитектуры, построен в 1515 г., возобновлен в 1798 г., у входа на столпе икона Тихвинской Божией Матери, прославленная чудотворениями; древний ОБраз святителя Николая и замечательный по древнему письму образ Нерукотворенного Спаса, особенно чтимый местными жителями; приделы: левый во имя святого апостола Иоанна Богослова, правый - во имя пророка Илии; в честь Покрова Пресвятой Богородицы с трапезной, с приделами с правой стороны - в честь Божией Матери Старорусской и во имя великомученицы Варвары; во имя 12-ти апостолов; в честь Воздвижение Честного Креста Господня; в честь Вознесения Господня, над святыми вратами, с приделом во имя святого мученика Феодора Стратилата; честь Тихвинской иконы Божией Матери, в башне, над западными вратам во имя святителя Николая, в башне, над восточными вратами; в честь иконы Божией Матери «Всех скорбящих Радость», при богадельне.

После революции 1917 г. обитель разделила печальную участь болышинства русских монастырей. В конце 20-х гг. в монастыре размещался войнский гарнизон, после войны помещения использовались частично для жилья и производственных нужд. С конца 60-х гг. архитектурные памятники монастыря были переданы краеведческому музею и начались работы по реставрации монастыря.

В 1995 г. было принято решение о возвращении монастыря Церкви. Тихвинский исторический краеведческий музей и Богородично-Успенский монастырь отныне совместно ведут работу по сохранению и возрождению русской святыни. Главная святыня монастыря - чудотворная икона Тихвинской Божией Матери «Одигитрия» - была вывезена во время Отечественной войны и находилась в православном храме в городе Чикаго.

В июле 2004 года икона возвратилась в монастырь.